Brucella mótefni Elisa Kit

Forskrift

 

Prófunaraðferðir og túlkun

 

Skref 1 prófunaraðferð

1.1 Þvottalausn undirbúningur

Wstyrkur orking wAshing vökvi:Fyrir notkun ætti að endurheimta þvottalausnina að stofuhita (20-25 gráðu) og hrista jafnt til að gera það einsleit. Þynntu síðan 20 sinnum þéttu þvottalausnina með hreinsuðu vatni (til dæmis er 5 ml þétt þvottalausn bætt við 95 ml hreinsað vatn), blandað vel saman og hægt er að geyma þynntan þvottavökva við 2-8 gráðu í 7 daga.

1.2 Undirbúningur sýnisins

① Hvíta dýrablóð var tekið, skilvindt við 4000 snúninga á mínútu í 10 mínútur og supernatant var safnað. Einnig er hægt að storkna sermi náttúrulega án blóðrauða.

② Þegar sýnishornið er stór, til að tryggja að viðbragðstími tilrauna sé í samræmi. Blandið sermissýni við mótefnamiðlunarlausnina við 1: 1 í þynningarplötunni (70UL sermissýni + 70 UL mótefni vinnulausn). Neikvæð stjórn og jákvæð stjórnun eru þau sömu og sermissýni.

1.3 Prófunaraðferð

① Taktu ensímmerkið örplötuna (samkvæmt fjölda sýna, er hægt að taka í sundur og nota það nokkrum sinnum), settu upp tvær holur hvor fyrir neikvæðar og jákvæðar stjórntæki, bættu 100UL af forblönduðu blöndunni við ensímmerkið örplötuna. Hristið sýnið varlega í holuna, notið þéttingarplötufilmuna til að hylja plötuna og ræktað við 37 gráðu í 30 mínútur.

② Opnaðu þéttingarplötufilmu, hristu af lausninni í plötunni, bættu við 300 il af vinnustyrkþvotti við hverja holu og fargaðu síðan vökvanum í holunni. Endurtaktu ofangreind skref 5 sinnum og klappaðu að lokum þurrt á hreinum frásogandi pappír.

③DIluted ensím samtenging:Þynntu ensímið samtengingu (50 ×) 50 sinnum (til dæmis: 20ul ensím samtenging þykkni + 980 ul þynning 1, er sérstaka magnið sem krafist er reiknað út í samræmi við fjölda prófsýna), blandaðu vel og settu til hliðar.

④ Badd 100 il af ensímstengdu við hverja holu, hylja plötuna og rækta við 37 gráðu í 30 mínútur.

⑤ Washing ensímplata, sérstök aðgerð er sú sama og ofangreind ②.

⑥ Badd 100 il undirlagslausn við hverja holu, hyljið plötuna og ræktið í 10 mínútur við 37 gráðu frá ljósi.

⑦ Badd 50 il stöðvunarlausn á hverri holu og ákvarða niðurstöðuna innan 5 mínútna.

 

Skref 2 Túlkun niðurstaðna

 

OD450 gildi hverrar holu var lesið á 96- vel örplötulesara.

2.1 Staðfesting

 

Meðaltal OD45 0 nm gildi jákvæðs stjórnunar var <0,35 og meðaltal OD450nm gildi neikvæðrar stjórnunar/jákvæðrar stjórnunar var meiri en eða jafnt og 3,5, tilraunaárangurinn voru gildir. Annars ætti að endurtaka prófið.

2.2 Útreikningsaðferð

Fyrir hvert sýni skaltu reikna Pi (blockingr át) á eftirfarandi hátt með leiðréttu sýnishorni og stjórnunargildum:

2.3 Túlkun niðurstaðna

Þegar pi <20%er það dæmt sem neikvætt.

Þegar pi> 30%er dæmt sem jákvætt.

Þegar 20% minna en eða jafnt og Pi minna en eða jafnt og 30% er það dæmt sem grunsamlegt og leggur til að endurtaka sýnatöku og prófa viku síðar.

maq per Qat: Brucella mótefni Elisa Kit, China Brucella mótefni Elisa Kit birgjar, framleiðendur, verksmiðja