Anti-ge svínir gervigreind mótefni mótefni ELISA Kit

Forskrift

PRV-GE AB ELISA

Ætlað notkun: Pseudorabies vírusinn GE blokkun

Mótefni ELISA uppgötvunarbúnað er til að ákvarða GE mótefni í sermi svíns af svínum gerviveiru veiru in vitro. Prófið er notað til að greina sýktar villtar

Veira og bólusett vegna bólusetningar með bóluefni gegn GE geni.

Sýnishorn: Sermi

Efni sem krafist er en ekki veitt:

Hreinsað vatn

Pipettor

96- vel örplata lesandi (450nm)

Tímastillir

Skilvindu (4000 snúninga)

Þvottavél

Ofn (37 gráðu)

 

Prófunaraðferðir og túlkun

Skref 1 prófunaraðferð

1.1 Þvottalausn undirbúningur

Wstyrkur orking wAshing vökvi:Fyrir notkun ætti að endurheimta þvottalausnina að stofuhita (20-25 gráðu) og hrista jafnt til að gera það einsleit. Þynntu síðan 20 sinnum þéttu þvottalausnina með hreinsuðu vatni (til dæmis er 5 ml þétt þvottalausn bætt við 95 ml hreinsað vatn), blandað vel saman og hægt er að geyma þynntan þvottavökva við 2-8 gráðu í 7 daga.

1.2 Undirbúningur sýnisins

① Heilt dýrablóð var tekið, skilvindt við 4000 snúninga á mínútu í 10 mínútur og supernatant var safnað. Einnig er hægt að storkna sermi náttúrulega án blóðrauða.

② Þynntu sermissýni 1: 1 (bætið 70UL sermissýni í 70ul sýni þynningarefni) og blandið vandlega.

Athugasemd: Ekki þarf að þynna neikvæða og jákvæða samanburði.

1.3 Prófunaraðferð

① Taktu ensímmerkið örplötuna (samkvæmt fjölda sýnanna er hægt að taka í sundur og nota það nokkrum sinnum), bæta 100ul af þynntu sermi við ensímmerkið örplöt og jákvætt eftirlit með viðbragðsbrunninum í sömu röð. Hristið sýnishorninu varlega í holuna, notið þéttingarplötumyndina til að hylja plötuna og rækta við 37 gráðu í 60 mínútur.

② Opnaðu þéttingarplötufilmu, hristu af lausninni í plötunni, bættu við 300 il af vinnustyrkþvotti við hverja holu og fargaðu síðan vökvanum í holunni. Endurtaktu ofangreind skref 5 sinnum og klappaðu að lokum þurrt á hreinum frásogandi pappír.

③ Badd 100 il af ensímstengdu við hverja holu, hylja plötuna og rækta við 37 gráðu í 30 mínútur.

④ Opnaðu þéttingarplötufilmu, hristu af lausninni í plötunni, bættu við 300 il af vinnustyrkþvotti við hverja holu og fargaðu síðan vökvanum í holunni. Endurtaktu ofangreind skref 5 sinnum og klappaðu að lokum þurrt á hreinum frásogandi pappír.

⑤ Badd 100 il undirlagslausn við hverja holu, hyljið plötuna og ræktið í 15 mínútur við 37 gráðu frá ljósi.

⑥ Badd 50 il stöðvunarlausn á hverri holu og ákvarða niðurstöðuna innan 5 mínútna.

Skref 2 Túlkun niðurstaðna

OD450 gildi hverrar holu var lesið á 96- vel örplötulesara.

2.1 Staðfesting

The average OD450nm value of negative control was ≥ 0.5 and the blocking rate of positive control was >50%, tilraunaniðurstöður voru gildar. Annars ætti að endurtaka prófið.

2.2 Útreikningsaðferð

Fyrir hvert sýni skaltu reikna Pi (blockingr át) á eftirfarandi hátt með leiðréttu sýnishorni og stjórnunargildum:

2.3 Túlkun niðurstaðna

Þegar pi <40%er það dæmt sem neikvætt.

Þegar pi> 50%er það dæmt sem jákvætt.

Þegar 40% minna en eða jafnt og Pi minna en eða jafnt og 50% er það dæmt sem grunsamlegt og leggur til að endurtaka sýnatöku og prófa viku síðar.

maq per Qat: and-ge svíns pseudorabies vírus mótefni ELISA KIT, Kína and-ge porcine gervigreind vírus mótefni ELISA Kit birgjar, framleiðendur, verksmiðju